期刊简介

               中华医学会主办,温州医学院承办。本刊是眼科学与视光学领域的高级学术性期刊。以广大眼科医生、视光配镜师、眼视光学科研人员为主要读者对象。报道眼视光学与视觉科学领域的最新研究成果、临床诊疗经验,以及与本学科相关的基础理论研究的最新进展。本刊主要栏目有:专家述评,专题论著,论著,临床研究,病例报告,文献综述。本刊原刊名为《眼视光学杂志》,目前已被国内外数十种权威数据库收录。                

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  • 杂志名称:中华眼视光学与视觉科学杂志
  • 主管单位:中国科学技术协会
  • 主办单位:中华医学会
  • 国际刊号:1674-845X
  • 国内刊号:11-5909/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:双效期刊期刊收录:知网收录(中), 国家图书馆馆藏, 哥白尼索引(波兰), 维普收录(中), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏
中华眼视光学与视觉科学杂志2016年第12期

PTEN抑制剂对脂多糖诱导兔角膜基质细胞炎性反应的影响

向阳;李轩;汤欣

关键词:角膜基质, 炎症, 脂多糖类, 第10号染色体丢失的张力蛋白同源的磷酸酶基因, 兔
摘要:目的:探讨第10号染色体丢失的张力蛋白同源的磷酸酶基因(PTEN)抑制剂双过氧化矾(BPV)对细菌脂多糖(LPS)诱导的兔角膜基质细胞炎症因子释放的影响及可能机制。方法实验研究。选取10只健康清洁级成年新西兰大白兔,采用组织块酶消化法获得原代兔角膜基质细胞并常规培养。取第2代细胞随机分为不同浓度梯度的LPS组(0.1、1、10μg/ml)及BPV组(250、500、1000 nmol/L)进行预实验,MTT比色法检测各组细胞存活率以确定合适的LPS及BPV浓度。实验组分为正常对照组、LPS组、LPS+BPV 组,运用实时荧光定量PCR 技术检测以上各组中白细胞介素-6(IL-6)及白细胞介素-8(IL-8)的mRNA表达水平;Western blot法分别检测各实验组PTEN及磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的蛋白相对表达量。ELISA法检测各实验组上清液中IL-6及IL-8的分泌量。数据分析采用单因素方差分析,独立样本t检验、线性回归分析。结果在预实验的MTT比色法检测中,不同浓度梯度的LPS、BPV均可降低角膜基质细胞存活率,总体差异均有统计学意义(χ2=22.32、17.82,P<0.01),选取1μg/ml、500 nmol/L分别作为LPS、BPV的实验浓度。实时荧光定量PCR检测结果显示,正常对照组、LPS组、LPS+BPV组IL-6、IL-8 mRNA的表达量总体差异均有统计学意义(F=46.65、42.59,P<0.01),两两比较显示LPS组IL-6、IL-8 mRNA的表达量(分别为1.29±0.19、1.11±0.04),明显高于正常对照组(均为1.00±0.00)(P<0.01),而LPS+BPV 组IL-6、IL-8 mRNA 的表达量(分别为1.17±0.08、0.92±0.15)明显低于 LPS 组(P<0.01)。 Western blot结果显示相对于正常对照组,LPS+BPV组细胞PTEN蛋白表达水平较低(t=29.39, P<0.01)。3组p-AKT的蛋白相对表达量总体差异均有统计学意义(F=62.83,P<0.01),两两比较显示LPS+BPV组p-AKT的蛋白表达量(0.82±0.07)明显高于LPS组(0.63±0.05)(P<0.01)。ELISA法检测结果显示,3组上清液中IL-6、IL-8相对浓度的差异均有统计学意义(F=32.41、27.13,P<0.01),与LPS组相比,正常对照组和LPS+BPV 组的IL-6、IL-8的相对浓度均明显较低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 PTEN的抑制剂BPV可下调由LPS诱导的兔角膜基质细胞炎症因子IL-6、IL-8基因表达及分泌,抑制角膜基质细胞炎症反应,PI3K/AKT信号传导通路可能在其中发挥重要调节作用。